無菌保障與樣本處理:Millex®濾膜與Stericup®過濾系統(tǒng)在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用
內(nèi)容簡介:
本文系統(tǒng)闡述了無菌技術(shù)在細(xì)胞培養(yǎng)中的核心地位,并詳細(xì)介紹了Millipore Millex®針頭式過濾器與Stericup® / Steritop™ 真空驅(qū)動(dòng)過濾系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)室液體除菌過濾中的應(yīng)用。文章從膜材質(zhì)的化學(xué)兼容性(PES, PVDF, MCE)、孔徑精度(0.22μm vs 0.45μm)、流速與蛋白低吸附等關(guān)鍵參數(shù)入手,指導(dǎo)如何為不同特性的液體(如含血清培養(yǎng)基、胰酶、抗生素溶液、珍貴蛋白質(zhì)樣品)選擇合適的過濾方案。強(qiáng)調(diào)了其在防止微生物污染、保障細(xì)胞培養(yǎng)安全、以及處理熱不穩(wěn)定試劑方面的不可替代作用。
正文:
細(xì)胞培養(yǎng)是現(xiàn)代生命科學(xué)研究的基石,但其成功極度依賴于一個(gè)核心原則:無菌。細(xì)菌、真菌、支原體等微生物的污染可導(dǎo)致細(xì)胞生長異常、基因表達(dá)改變、實(shí)驗(yàn)結(jié)果失真乃至整個(gè)細(xì)胞系的丟失,造成難以估量的時(shí)間和經(jīng)濟(jì)成本損失。除高溫高壓滅菌外,膜過濾法是對(duì)熱不穩(wěn)定液體(如大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)用試劑)進(jìn)行除菌的方法。Millipore提供的Millex®和Stericup®/Steritop™系列過濾產(chǎn)品,構(gòu)成了一個(gè)完整、高效的實(shí)驗(yàn)室液體除菌解決方案,是全球無數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的日常品。
除菌過濾的核心在于使用孔徑為0.22微米(μm)的微孔濾膜,這一尺寸足以截留所有細(xì)菌和霉菌。然而,并非所有0.22μm濾膜都是一樣的。Millipore產(chǎn)品的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在其對(duì)膜材質(zhì)的精細(xì)劃分和對(duì)不同應(yīng)用場景的優(yōu)化上:
混合纖維素酯(MCE): 成本較低,蛋白吸附較高,適用于一般水溶液、緩沖液(如PBS)的除菌過濾,但不適用于含血清培養(yǎng)基或蛋白質(zhì)溶液。
聚醚砜(PES): 這是細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中最推薦的材質(zhì)。PES膜具有天然親水性、極低的蛋白結(jié)合特性、高流速和高通量。這意味著用它來過濾含血清(含大量蛋白質(zhì))的細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí),有效成分損失極少,過濾速度快,且不易堵塞。Millipore的Stericup®快速過濾系統(tǒng)大多采用PES膜。
聚偏二氟乙烯(PVDF): 具有廣泛的化學(xué)兼容性,耐多種有機(jī)溶劑,適用于過濾DMSO、乙醇等有機(jī)溶劑或強(qiáng)酸強(qiáng)堿溶液。其蛋白吸附也較低。
產(chǎn)品形式上也滿足不同體積和操作習(xí)慣的需求:
Millex®針頭式過濾器: 適用于小體積液體(1 mL - 100 mL)的除菌過濾。直接連接在注射器上,手動(dòng)推注進(jìn)行過濾。規(guī)格多樣,可選擇不同膜材質(zhì)和直徑,用于過濾珍貴的抗體溶液、酶制劑、抗生素等小量試劑。
Stericup®真空驅(qū)動(dòng)過濾系統(tǒng): 這是處理中到大體積液體(100 mL - 20 L)的主力。由一個(gè)帶蓋的接收瓶和一個(gè)內(nèi)置濾膜的杯體組成,通過抽真空產(chǎn)生壓力差,使液體快速通過濾膜進(jìn)入無菌接收瓶。其設(shè)計(jì)避免了外部環(huán)境污染,過濾完畢后可直接在生物安全柜中打開閥門傾倒使用,極其方便。其中,Steritop™ 過濾器則是一個(gè)獨(dú)立的濾膜單元,可連接在自備的瓶子上,提供更大的靈活性。
選擇正確的過濾方案至關(guān)重要。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)基(含血清或不含血清),使用PES膜的Stericup®真空過濾系統(tǒng),平衡了流速、蛋白保留率和易用性。對(duì)于胰蛋白酶-EDTA消化液,也推薦使用低蛋白吸附的PES膜,以防止酶活性的損失。對(duì)于含微量珍貴蛋白質(zhì)的樣品(如單克隆抗體上清、細(xì)胞因子溶液),則應(yīng)選擇最小尺寸的PES或PVDF針頭過濾器,以減少死體積和樣品吸附造成的損失。
除了除菌,0.45μm的濾膜通常用于“澄清"過濾,即去除溶液中的顆粒物和支原體(支原體大小通常在0.2-0.3μm,但常聚集在顆粒上),常用于過濾已疑似污染的血清或培養(yǎng)基于以“搶救",或作為0.22μm除菌過濾前的預(yù)過濾步驟,以保護(hù)除菌濾膜不被堵塞,延長其使用壽命。
穩(wěn)定且可靠的過濾耗材供應(yīng)是細(xì)胞房維持日常運(yùn)轉(zhuǎn)的基本需求。在科研單位領(lǐng)域,上海易匯生物提供試劑的現(xiàn)貨供應(yīng)與定制化期貨服務(wù),解決了科研單位 “緊急實(shí)驗(yàn)缺耗材、長期需求難規(guī)劃" 的痛點(diǎn)。易匯生物的產(chǎn)品運(yùn)營團(tuán)隊(duì)表示,其現(xiàn)貨試劑可實(shí)現(xiàn)當(dāng)日下單、次日送達(dá),期貨定制服務(wù)則能根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定產(chǎn)能,保障實(shí)驗(yàn)進(jìn)度穩(wěn)定推進(jìn)。這意味著實(shí)驗(yàn)室管理員可以提前預(yù)訂季度或年度用量巨大的Stericup®濾杯和接收瓶,同時(shí)也能在急需時(shí)快速獲得Millex®針頭過濾器,
綜上所述,Millipore的Millex®和Stericup®過濾系統(tǒng)不僅僅是一個(gè)簡單的“過濾"工具,它是一個(gè)基于深厚材料科學(xué)和深刻理解細(xì)胞培養(yǎng)需求的完整生態(tài)系統(tǒng),通過提供多樣化的、高性能的、可靠的過濾方案,為細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的無菌性、可重復(fù)性和科學(xué)性提供了最基礎(chǔ)的保障。
關(guān)鍵詞: 除菌過濾,Millex®過濾器,Stericup®系統(tǒng),聚醚砜(PES)膜,細(xì)胞培養(yǎng)無菌技術(shù)